生物大分子的穩(wěn)定性與保存方法有很大關(guān)系。干燥的制品一般比較穩(wěn)定,在低溫情況下其活性可在數(shù)日甚至數(shù)年無明顯變化,主艙要求簡單,只要將干燥的樣品置于干燥器內(nèi)(內(nèi)裝有干燥劑)密封,保存在0~4℃冰箱即可。液態(tài)貯藏也有其優(yōu)...[繼續(xù)閱讀]
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生物大分子的穩(wěn)定性與保存方法有很大關(guān)系。干燥的制品一般比較穩(wěn)定,在低溫情況下其活性可在數(shù)日甚至數(shù)年無明顯變化,主艙要求簡單,只要將干燥的樣品置于干燥器內(nèi)(內(nèi)裝有干燥劑)密封,保存在0~4℃冰箱即可。液態(tài)貯藏也有其優(yōu)...[繼續(xù)閱讀]
吸附法(adsorption)是通過載體表面和酶分子表面間的次級鍵相互作用而達到固定目的的方法,是固定化中最簡單的方法。酶與載體之間的親和力是范德華力、疏水相互作用、離子鍵和氫鍵等。吸附法又可分為物理吸附法和離子吸附法。...[繼續(xù)閱讀]
包埋法(entrapment)是將酶或含酶菌體包埋在各種多孔載體中而使酶固定化的方法。包埋法制備的固定化酶結(jié)構(gòu)可防止酶滲出,底物需要滲入格子內(nèi)或半透膜內(nèi)與酶接觸。此法較為簡便,固定化時一般不需要與酶蛋白的氨基酸殘基起結(jié)合反...[繼續(xù)閱讀]
這是借助共價鍵將酶的活性非必需側(cè)鏈基團和載體的功能基團進行偶聯(lián)以制備固定化酶的方法。如此得到的固定化酶結(jié)合牢固、穩(wěn)定性好、利于連續(xù)使用,是目前應(yīng)用和報道得最多的一類方法。共價偶聯(lián)反應(yīng)一般比較激烈,易使酶變性...[繼續(xù)閱讀]
交聯(lián)法利用雙功能或多功能試劑(bifunctionalormulti-functionalreagent)在酶分子間、酶分子與惰性蛋白間或酶分子與載體間進行交聯(lián)反應(yīng),以共價鍵制備固定化酶的方法。雙功能和多功能試劑根據(jù)它們的功能基團相同與不同可分為“同型”和...[繼續(xù)閱讀]
熱處理法是將含酶細胞在一定溫度下加熱處理一段時間,使酶固定在菌體內(nèi)而制備得到固定化菌體的方法。熱處理法只適用于那些熱穩(wěn)定性較好的酶的固定化,在加熱處理時,要嚴格控制好加熱溫度和時間,以免引起酶的變性失活。例如...[繼續(xù)閱讀]
固定化酶的形狀多樣,依不同用途有顆粒、線條、薄膜和酶管等形狀。其中顆粒狀占絕大多數(shù),它和線條這兩種形狀主要用于工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn),如裝成酶柱用于連續(xù)生產(chǎn),或在反應(yīng)器中進行批式攪拌反應(yīng);薄膜主要用于酶電極,應(yīng)用于分析化...[繼續(xù)閱讀]
酶在水溶液中以自由的游離狀態(tài)存在,但是固定后酶分子便從游離的狀態(tài)變?yōu)槔喂痰亟Y(jié)合于載體的狀態(tài),其結(jié)果往往引起酶的性質(zhì)的改變。為此,在固定化酶的應(yīng)用過程中,必須了解固定化酶的性質(zhì)與游離酶之間的差別,并對操作條件加以...[繼續(xù)閱讀]
固定化酶的活力在多數(shù)情況下比天然酶的活力低,其原因可能是:①酶活性中心的重要氨基酸殘基與水不溶性載體相結(jié)合;②當酶與載體結(jié)合時,它的高級結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化,其構(gòu)象的改變導(dǎo)致了酶與底物結(jié)合能力或催化底物轉(zhuǎn)化能力的改變...[繼續(xù)閱讀]
游離酶的一個突出缺點是穩(wěn)定性差。而固定化酶的穩(wěn)定性一般都比游離酶高得多,這對酶的應(yīng)用是非常有利的,其穩(wěn)定性增強主要表現(xiàn)在如下幾個方面。1.操作穩(wěn)定性酶的固定化方法不同,所得的固定化酶的操作穩(wěn)定性也有差異。固定化...[繼續(xù)閱讀]