在細(xì)胞中有許多種還原成分(如谷氨酰胺)可防止蛋白質(zhì)氧化,但是一旦細(xì)胞破碎,由于和氧的接觸以及稀釋作用而引起抗氧化成分的減少,使許多蛋白質(zhì)被氧化而失去活性。氧化作用可在蛋白質(zhì)的若干位點(diǎn)上發(fā)生,盡管有時(shí)可通過減少巰...[繼續(xù)閱讀]

    膜蛋白的提取是蛋白質(zhì)提取的一個(gè)特例。在膜蛋白的提取和純化過程中常會(huì)用到去垢劑,在去垢劑的幫助下使膜蛋白溶解。去垢劑是一種一端親水一端疏水的兩性雙極性小分子,可在水中溶解。除了膽酸鹽以外,去垢劑分子通常是由線...[繼續(xù)閱讀]

    在提取、純化蛋白質(zhì)時(shí),其效果常常受到本身存在的水解酶的影響。在提取蛋白質(zhì)的同時(shí)破碎的細(xì)胞可釋放出蛋白酶,這些酶在與欲提取的蛋白質(zhì)接觸時(shí),一旦條件適宜,就會(huì)發(fā)生反應(yīng),導(dǎo)致蛋白質(zhì)分解,使實(shí)驗(yàn)失敗。因此,在蛋白質(zhì)提取過...[繼續(xù)閱讀]

    (一)原料的選擇蛋白質(zhì)在分離純化過程中,能否成功提取其有效成分與原材料的選用有密切關(guān)系。原料的選擇主要依據(jù)所提取的目標(biāo)蛋白質(zhì)和實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?。從工業(yè)生產(chǎn)角度考慮,理想的原料應(yīng)含量高、來源豐富、穩(wěn)定性好、成本低、...[繼續(xù)閱讀]

    在蛋白質(zhì)的提取分離過程中,常常遇到目標(biāo)蛋白質(zhì)存在于細(xì)胞內(nèi)的情況,需要破碎細(xì)胞。事實(shí)上,除了提取細(xì)胞外成分,對(duì)細(xì)胞內(nèi)及多細(xì)胞生物組織中蛋白質(zhì)的分離提取均需先將細(xì)胞破碎,使其充分釋放到溶液中。不同的生物體或同一生物...[繼續(xù)閱讀]

    制備某種生物大分子時(shí),往往需要采用細(xì)胞中某一部分為材料;或者為了純化某一特定細(xì)胞器上的生物大分子,通常破碎細(xì)胞后,先分離各組分,以防干擾,這對(duì)制備一些高難度和高純度的生物大分子是必要的。細(xì)胞器的分離一般采用差速...[繼續(xù)閱讀]

    影響蛋白質(zhì)水解變性的因素有外在因素和內(nèi)在因素兩方面,外在影響因素主要包括細(xì)胞破碎方式、緩沖液pH、溫度、離子強(qiáng)度、還原劑和金屬離子等;而內(nèi)在影響因素主要是蛋白水解酶的問題,提取過程中要注意采取一定的保護(hù)措施。一...[繼續(xù)閱讀]

    (一)蛋白質(zhì)提取液的濃縮濃縮是低濃度的溶液除去水或溶劑變?yōu)楦邼舛鹊娜芤旱倪^程。蛋白質(zhì)產(chǎn)品制備工藝中往往在提取后和結(jié)晶前進(jìn)行濃縮。加熱和減壓蒸發(fā)是最常用的方法,一些分離提純方法也能起濃縮作用。例如,離子交換法與...[繼續(xù)閱讀]

    動(dòng)物材料中的蛋白質(zhì)有些是以可溶的形式存在于體液(如血漿)中,這些蛋白質(zhì)可以不必經(jīng)過提取直接進(jìn)行分離;而有些像角蛋白、膠原蛋白等一些不溶性蛋白,必須先除去一些與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的結(jié)締組織、脂肪組織,再用適當(dāng)?shù)姆椒ㄌ崛『蟛?..[繼續(xù)閱讀]

    植物組織中包含有多種蛋白質(zhì),它們?cè)谛再|(zhì)上存在著巨大的差異,并且需要特殊的條件才能進(jìn)行提取和純化。因此,用單一的提取方案應(yīng)用于所有植物蛋白質(zhì)的提取是行不通的。在初始階段就必須考慮提取比例和可能使用到的相應(yīng)型號(hào)...[繼續(xù)閱讀]