(一)生成鹽復(fù)合物沉淀法蛋白質(zhì)等生物大分子和小分子都可以生成鹽類復(fù)合物沉淀,此法一般可分為3種:與生物分子的酸性功能基團(tuán)作用(如銅鹽、銀鹽、鋅鹽、鈣鹽等);與生物分子的堿性基團(tuán)作用(如苦味酸鹽、苦酮酸鹽、單寧酸鹽等...[繼續(xù)閱讀]
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(一)生成鹽復(fù)合物沉淀法蛋白質(zhì)等生物大分子和小分子都可以生成鹽類復(fù)合物沉淀,此法一般可分為3種:與生物分子的酸性功能基團(tuán)作用(如銅鹽、銀鹽、鋅鹽、鈣鹽等);與生物分子的堿性基團(tuán)作用(如苦味酸鹽、苦酮酸鹽、單寧酸鹽等...[繼續(xù)閱讀]
透析的原理是指溶質(zhì)從半透膜的一側(cè)透過膜至另一側(cè)的過程,任何天然的(如腹膜)或人造的半透膜,只要該膜含有使一定大小的溶質(zhì)通過的孔徑,那么溶質(zhì)分子就可以通過擴(kuò)散和對(duì)流從膜的一側(cè)移動(dòng)到膜的另一側(cè)。其基本原理是分子的擴(kuò)...[繼續(xù)閱讀]
1.透析袋的處理商品透析袋制成管狀,出廠時(shí)都用10%的甘油處理過,并含有極微量的硫化物、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質(zhì),它們對(duì)蛋白質(zhì)和其他生物活性物質(zhì)有害,用前必須除去??上扔?0%乙醇煮沸1h,再依次用50%乙醇、0.01mol/LNaHC...[繼續(xù)閱讀]
在蛋白質(zhì)分離純化過程中,透析主要用于鹽析之后的除鹽。如在酵母菌表達(dá)產(chǎn)物的純化過程中,在55%硫酸銨飽和沉淀之后,將所得的蛋白質(zhì)溶液轉(zhuǎn)入透析袋中,將透析袋放入10倍蛋白質(zhì)溶液體積的無(wú)菌PBS中,用磁力攪拌器攪拌以促進(jìn)液體平...[繼續(xù)閱讀]
超濾屬于膜分離的范疇。膜分離是速率控制的傳質(zhì)過程,具有設(shè)備簡(jiǎn)單、可在室溫或低溫下操作、無(wú)相變、處理效率高和節(jié)能等優(yōu)點(diǎn),適用于熱敏性的蛋白質(zhì)等生物大分子的分離純化。超濾可分離分子質(zhì)量3000~1000000u的可溶性大分子物...[繼續(xù)閱讀]
膜是超濾的關(guān)鍵器材,為了提高濾液的透過速度,膜表面單位面積上能穿過某種分子的“孔穴”應(yīng)該多,而孔隙的長(zhǎng)度應(yīng)該小。這樣就產(chǎn)生了流速和膜強(qiáng)度之間的矛盾。膜有各種不同的類型和規(guī)格,可根據(jù)工作的需要來(lái)選用。早期的膜是...[繼續(xù)閱讀]
(一)超濾膜的選擇超濾膜的基本性能指標(biāo)主要有:水通量[cm3/(cm2·h)];截留率[以百分率(%)表示];物理化學(xué)穩(wěn)定性(包括機(jī)械強(qiáng)度)等。水通量是指一定壓力下單位時(shí)間內(nèi)通過單位膜面積的水量。商品膜的規(guī)格型號(hào)甚多,在選擇時(shí)必須注意以...[繼續(xù)閱讀]
隨著超濾技術(shù)的不斷改進(jìn),其已被廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)等生物大分子的制備、水處理、醫(yī)藥工業(yè)及食品加工工業(yè)中。1.蛋白質(zhì)的純化在蛋白質(zhì)的分離純化技術(shù)中,超濾主要用于脫鹽、脫水和濃縮等,并具有成本低,操作方便,條件溫和,能較好...[繼續(xù)閱讀]
當(dāng)把一個(gè)帶靜電荷(Q)的顆粒放入電場(chǎng)時(shí),便有一個(gè)電場(chǎng)力(F)作用于其上。F的大小等于質(zhì)點(diǎn)所帶凈電荷量(Q)與電場(chǎng)強(qiáng)度(E)的乘積,可用下式表示:F=QE(5-1)由于F的作用,使帶點(diǎn)顆粒在電場(chǎng)中向一定方向泳動(dòng)。質(zhì)點(diǎn)的前移還要受到阻力(F′)的...[繼續(xù)閱讀]
電泳的種類繁多,但基本原理一致,按分離原理和有無(wú)支持物分別分類如下。(一)按分離的原理分類按分離的原理,可分為區(qū)帶電泳、移界電泳和穩(wěn)態(tài)電泳。1.區(qū)帶電泳區(qū)帶電泳是指有支持介質(zhì)的電泳,待分離物質(zhì)在支持介質(zhì)上分離成若干...[繼續(xù)閱讀]