鮑曼不動(dòng)桿菌5075株Hcp基因的蛋白生物信息分析及原核表達(dá)載體的構(gòu)建
摘要: 目的:構(gòu)建鮑曼不動(dòng)桿菌5075株溶血素共調(diào)節(jié)蛋白(Hcp)基因的原核表達(dá)載體,完成蛋白的高效表達(dá)與純化。方法:在Hcp蛋白生物信息分析的基礎(chǔ)上,通過(guò)PCR方法擴(kuò)增目的基因,對(duì)目的片段和pET-28a(+)質(zhì)粒分別進(jìn)行BamHⅠ和XhoⅠ位點(diǎn)的雙酶切后連接并轉(zhuǎn)化DH5α大腸埃希菌,于含抗卡那霉素的LB固體培養(yǎng)基上篩選,隨機(jī)挑取單菌落進(jìn)行菌落PCR鑒定及測(cè)序鑒定。將測(cè)序正確的pET... ...
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